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双峰驼诱导排卵因子的提纯与生化结构的研究

双峰驼诱导排卵因子的提纯与生化结构的研究

作者:   文章来源:   发表时间:2013-11-25    点击量:

  双峰驼是一种具有研究价值的优良抗逆畜种,其由精清诱导排卵的特殊生殖生理现象一直未 被深入研究。

  本研究借助当代生物学先进技术,深入到蛋白质的分子水平,揭示了双峰驼诱导排卵因子(O IF)的分子本质、以大量的工作,详实的数据证明OIF是哺乳动物的一种尚未被发现的新激素 ,此发现不仅为双峰驼排卵机理的阐明奠定了基础,也为实践应用捉供了理论依据。具体研 究内容如下:

  一、本项研究系统地分析、测试了公驼精清的生化特性,发现公驼精液是一种特别厌氧的蛋 白质胶体混合物,由分子量介于12,831~72,390道尔顿的24种蛋白质组成。

  二、应用凝胶过滤(Sephacryl-S-200)和离子交换技术(DEAE-纤维素DE52),从公驼精清内分 离出诱导排卵活性蛋白组分L2,继而应用高效液相色谱的二醇大孔硅胶填料Diol-1000反相 液相色谱ODS柱上纯化公驼精清诱导排卵因子(OIF)。

  三、应用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和分子排阻液相色谱法测取了各组份和馏分的分子量以及 诱导排卵因子的氨基酸组成并用飞行时间质谱校正活性馏分L2-2的分子量。

  四、用生物化学层析方法分离的活性组份L2,再经高效液相色谱分离的活性馏分L2-2。诱导 排卵特性并不相同。L2组份可诱导实验动物家兔和小鼠出现非典型排卵;活性馏份L2-2可诱 导小鼠超数排卵,说明明其蛋白外膜对生物活性有一定影响。这些活性组份或馏分均可诱 导母驼排卵,说明采用的分离方法有效,对其生物活性的保存方法合理,从而进一步探寻其 实用价值提供了可能。

  五、植物凝集素(PHA)的双扩散专一凝集试验结果说明,公驼精清内含有2种以上的粘蛋白或 糖蛋白,但其内的活性组(馏)分以及诱导排卵因子均与糖蛋白无关。